影響顯微鏡分辨率的因素有：

1、色差 

色差是透鏡成像的一個嚴(yán)重缺陷，發(fā)生在多色光為光源的情況下，單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍(lán) 紫 七種組成，各種光的波長不同 ，所以在通過透鏡時的折射率也不同，這樣物方一個點(diǎn)，在像方則可能形成一個色斑。 

色差一般有位置色差，放大率色差。位置色差使像在任何位置觀察，都帶有色斑或暈環(huán)，使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣。

2、球差 

球差是軸上點(diǎn)的單色相差，是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結(jié) 果是，一個點(diǎn)成像后，不在是個亮點(diǎn)，而是一個中間亮、邊緣逐漸模糊的亮斑。從而影響成像質(zhì)量。 

球差的矯正常利用透鏡組合來消除，由于凸、凹透鏡的球差是相反的，可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來給予消除。舊型號顯微鏡，物鏡的球差沒有完全矯正，應(yīng)與相應(yīng)的補(bǔ)償目鏡配合，才能達(dá)到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差完全由物鏡消除。

3、慧差

慧差屬軸外點(diǎn)的單色相差。軸外物點(diǎn)以大孔徑光束成像時，發(fā)出的光束通過透鏡后，不再相交一點(diǎn)，則一光點(diǎn)的像便會得到一逗點(diǎn)狀，型如慧星，故稱“慧差”。 

4、像散

像散也是影響清晰度的軸外點(diǎn)單色相差。當(dāng)視場很大時，邊緣上的物點(diǎn)離光軸遠(yuǎn)，光束傾斜大，經(jīng)透鏡后則引起像散。像散使原來的物點(diǎn)在成像后變成兩個分離并且相互垂直的短線，在理想像平面上綜合后，形成一個橢圓形的斑點(diǎn)。像散是通過復(fù)雜的透鏡組合來消除。

5、  場曲 

場曲又稱“像場彎曲”。當(dāng)透鏡存在場曲時，整個光束的交點(diǎn)不與理想像點(diǎn)重合，雖然在每個特定點(diǎn)都能得到清晰的像點(diǎn)，但整個像平面則是一個曲面。這樣在鏡檢時不能同時看清整個相面，給觀察和照相造成困難。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場物鏡，這種物鏡已經(jīng)矯正了場曲。 

6、  畸變 

前面所說各種相差除場曲外，都影響像的清晰度?；兪橇硪环N性質(zhì)的相差，光束的同心性不受到破壞。因此，不影響像的清晰度，但使像與原物體比，在形狀上造成失真。 

（1） 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時，則在像方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)像； 

（2） 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時，則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)像； 

（3） 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi)，焦點(diǎn)以外時，則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)像； 

（4） 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時，則像方不能成像； 

（5） 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時，則像方也無像的形成，而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛像。

分辨率 顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點(diǎn)的*小間距，又稱"鑒別率"。其計算公式是σ=λ/NA 式中σ為*小分辨距離；λ為光線的波長；NA為物鏡的數(shù)值孔徑?？梢娢镧R的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個因素決定。NA值越大，照明光線波長越短，則σ值越小，分辨率就越高。要提高分辨率，即減小σ值，可采取以下措施:

（1） 降低波長λ值，使用短波長光源。

（2） 增大介質(zhì)n值以提高NA值（NA=nsinu/2）。

（3） 增大孔徑角u值以提高NA值。

（4） 增加明暗反差。